實(shí)驗(yàn)結(jié)果

一、 利用細(xì)胞免疫染色法，了解細(xì)胞內(nèi)胞器的分布情形。

我們使用Hochest 33258此種螢光物質(zhì)與DNA結(jié)合發(fā)出藍(lán)色螢光，可以指示細(xì)胞核所在的位置。接著加入會(huì)辨識(shí)Golgin-245（一種已知會(huì)位于哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)高基氏體的蛋白質(zhì)）的抗體，以及具有綠色螢光物質(zhì)標(biāo)定的二級(jí)抗體進(jìn)行免疫染色作用。我們觀察到細(xì)胞中有綠色螢光訊息的區(qū)域，得知高基氏體這種胞器所在的位置。

二、CTB-594 nm的內(nèi)胞作用。

為了觀察細(xì)胞的內(nèi)胞作用，我們以會(huì)激發(fā)出紅光的CTB-594 nm分子（一種會(huì)被細(xì)胞經(jīng)內(nèi)胞作用而運(yùn)送至高基氏體的毒蛋白質(zhì)）與活細(xì)胞作用30分鐘后，發(fā)現(xiàn)CTB-594 nm (紅光) 會(huì)與標(biāo)示高基氏體的Golgin-245 (綠光) 訊號(hào)重疊，表示CTB-594 nm分子的確會(huì)被運(yùn)送至高基氏體，由此可以得知內(nèi)胞作用的存在。

三、Tf-488 nm的內(nèi)胞作用。

為了觀察細(xì)胞的內(nèi)胞作用，我們以會(huì)激發(fā)出綠光的Tf-488 nm分子（一種會(huì)被細(xì)胞經(jīng)內(nèi)胞作用而運(yùn)送至高基氏體的運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)）與活細(xì)胞作用30分鐘后，發(fā)現(xiàn)Tf-488 (綠光) 會(huì)與標(biāo)示高基氏體的Golgin-245 (紅光) 訊號(hào)重疊，表示Tf-488 nm分子的確會(huì)被運(yùn)送至高基氏體，由此可以得知內(nèi)胞作用的存在。（因Tf-488 nm被激發(fā)后會(huì)發(fā)出綠光，所以我們改用會(huì)被激發(fā)出紅光的Golgin-245來作為高基氏體的標(biāo)示物）。

四、VSVG-GFP的外釋作用。

我們利用VSVG-GFP（一種病毒醣蛋白質(zhì)與綠色螢光蛋白質(zhì)結(jié)合的分子）來觀察此種蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸過程，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示綠色的螢光物質(zhì)散佈在細(xì)胞膜及細(xì)胞間質(zhì)中，由此可知VSVG-GFP在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成并運(yùn)送至高基氏體后，會(huì)再運(yùn)送至細(xì)胞膜。

五、蛋白質(zhì)運(yùn)送的調(diào)節(jié)作用。

我們已知ARL1這種分子會(huì)調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的運(yùn)輸作用，所以運(yùn)用轉(zhuǎn)染的方式讓細(xì)胞同時(shí)大量表現(xiàn)ARL1突變株 (ARL1QL) 、VSVG-GFP (綠色)，觀察在有ARL1QL存在時(shí)，VSVG-GFP將無法順利地輸送至細(xì)胞膜上，轉(zhuǎn)而堆積在高基氏體中。